刺蒺藜提取物（Tribulus Terrestis P.E)的真伪鉴别
及检测方法比较
刺蒺藜在最早的提取生产时原料采用果实，因与传统中药使用的部位相同，造成市场供应的短缺和原材料成本的大幅上升。后经研究发现，其茎叶中含有的有效成分同果实相同，且经提取后含量和收率方面均高于果实提取的成分。现如今，市面销售的刺蒺藜提取物均为刺蒺藜茎叶提取的产品。
刺蒺藜中原薯蓣皂甙（Protodioscin)成分，经过我公司多次分析和检测，我国境内所产的刺蒺藜原材料中原薯蓣皂甙成分均在微量水平。
刺蒺藜中的灰分偏高问题，根据我们公司长期的对该品种的原药材跟踪显示，总灰分含量在7月23日前波动较大，7月30日后明显下降，9月25日测定结果为最低值8.44%，其次是8月23日的8.75%。8月23日、9月7日和9月25日3次平均值为10.03%，明显低于从6月25日到9月25日灰分含量的总平均值16.72%。
刺蒺藜具有明显的苦味和十分强烈的吸湿性。根据我们公司操作经验，该产品在粉碎过筛过程中空气中会有明显的扩散性苦味。操作后，嗓子内苦味久久不能散去。且暴漏在空气中比较容易吸潮结块。
以下就刺蒺藜的两种检测方法做相应的比较：
蒺藜总皂甙（Tribuloside）含量UV测定方法
一、仪器与试剂
1．仪器：UV-2101 PC紫外-可见光分光光度计。
2．试剂：甲醇、氯化钴、改良对二甲氨基苯甲醛（取对二甲氨基苯甲醛1g，加盐酸34mL，甲醇100mL，混匀，即得）。
二、溶液制备
1．样品溶液制备 精密称取提取物样品约120mg（60%总皂甙），原料样品（2000～1600mg），置50mL量瓶中，加甲醇约20ml，超声波振荡（提取物20min；原料1h），冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，过滤，精密吸取滤液5mL，置具塞试管中，改良对二甲氨基苯甲醛溶液5mL，密塞，摇匀，置58±2℃水浴中加热2h，迅即冷却至室温，即得样品溶液。
2．样品用空白溶液制备 以甲醇代替样品溶液，同法处理即得空白溶液。
3．标准品溶液制备 精密称取氯化钴试剂约0.6g，置25mL量瓶中，加水使溶解，用水定容，摇匀即得标准品溶液。
4．标准品用空白溶液制备 以水为空白溶液。
三、样品测定
打开仪器电源，预热20min，待仪器自检通过后，在515nm处分别以水和样品空白溶液作为空白，测定标准品溶液和样品溶液吸收度。
四、结果计算
式中：A、W分别代表样品吸收值和称样量（mg）
As、Ws分别代表标准品吸收值和称样量（mg）
蒺藜总皂甙（Tribuloside）含量重量法测定方法
本标准规定了重量法测定蒺藜总皂苷的操作规程，适用于蒺藜提取物中总皂苷的含量测定。
1 方法来源
国外客户提供的方法
2 试剂
2.1 石油醚（沸程30°C--60°C）
2.2 甲醇（AR级）
2.3 丙酮（AR级）
3 仪器和用具
3.1 分析天平：1/10000
3.2 玻璃仪器：磨口三角烧瓶（100ml），烧杯（250ml）,三角漏斗
3.3 超声波发生器
3.4 恒温水浴锅
3.5 烘箱
3.6 定量滤纸
4 操作步骤
4.1 精密称取提取物粉末1.5g~2.0g置磨口三角烧瓶中。
4.2 加50ml石油醚，超声提取5min，放置使分层，通过滤纸过滤弃去上层石油醚液。
4.3 重复上述操作2次至石油醚液不再显绿色。
4.4 过滤后的残渣热风或水溶挥干石油醚液，加60ml的甲醇在80°C的水浴上回流30min，静置，通过原来的滤纸过滤，用烧杯收集甲醇液。
4.5 重复4.4的操作3次，合并甲醇液。
4.6 将合并的甲醇液在80°C水浴锅上浓缩至约25 ml时，放置至室温。
4.7 加丙酮150ml至烧杯中，边加边快速搅拌，用105°C干燥1.5h的滤纸过滤，放置。4.8 待丙酮充分挥干后，将滤纸连同滤渣置瓷盘中，于105°C的烘箱中烘烤1.5h后取出称定滤纸重量。
5 计算
M1：残渣的重量（g）
M：取样量（g）
6 注意
6.1 每次进行平行对照，二者的差值不得过±5%。
6.2 在4.4步骤用甲醇进行最后一次提取前，检查滤纸是否干净，如滤纸上沾有较多的提取物粉末，则将滤纸剪碎后放入三角烧瓶中，再加甲醇提取。
6.3 操作过程中注意劳动防护。
根据我公司日常操作和实践经验，以上两种方法各有利弊：
1.总皂甙UV测试方法误差偏大，且检测结果经常会超过100%。容易引起客户怀疑，尤其在普遍检测结果偏低的情况下出现含量超过100%的情况。
2.UV测试方法中标品为六水合氯化钴，而非大家判断的计算检测结果中要减去水分子的占比。
3.UV测试方法的人为误差偏大，同样的人，同样的设备，测试结果每次均有差距。且经常超过5%的误差。
4.重量法较UV测试方法稳定，且不同的人不同的仪器操作结果不会有太大差距。一般误差在3%以内。
5.重量法能区别刺蒺藜提取物的真伪，防止添加其他成分增加吸收度。
根据以上比较和总结，刺蒺藜提取物的真伪主要从以下几点区分：
1.真货刺蒺藜具有特殊苦辛味，味道入喉极苦。添加其他成分如水杨甙枳实等增加吸光度的基本没有苦味。
2.真货暴漏空气中极易吸潮。添加产品由于黄糊精的增多，吸湿性降低。
3.刺蒺藜提取物真正提取的产品灰分较高，比如90%含量的产品灰分超过20%。其中主要灰分为钙、镁等无机物。添加混配的产品因为使用了糊精，灰分较低。
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